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造血干/祖细胞的表面标志

干细胞的抗原性极微弱,仅有很少的表面抗原,反映干细胞的原始性。祖细胞在分化过程中逐渐出现更多的表面抗原,即分化抗原。近年来造血干/祖细胞表面标志(surface marker)研究的发展,大大促进了干/祖细胞分离纯化及鉴定等研究。细胞表面的CD34抗原在干细胞为强阳性,在早期祖细胞仍为阳性,它的表达一直持续到晚期祖细胞。CD34+细胞群中90%以上为祖细胞。造血干细胞后来又出现Thy1、c-kit(人),以及Sca-1、Sca-2(鼠)等表面抗原。在造血干细胞初期分化产生的最早期祖细胞出现了CD33、CD38、HLA-DR及CD45RO等分化抗原。当祖细胞定向分化时出现“系特异性抗原”(lineage specific antigen),包括:粒系的CD11、CD13、CD15、CD16等;单核系的CD14;T/B淋巴系的CD3、CD4、CD8、CD19、CD20、CD21、CD22;T/NK系的CD2、CD11、CD25、CD7、CD56;红系的CD47、CD59、CD71以及巨核系的CD31、CD41、CD42、CD61、CD107等,统称为Lin抗原。在精选干细胞时,可选测其中3~5个代表各系的抗原。如均为阴性,即为Lin阴性;若均为阳性,即是Lin阳性。

进一步精选干细胞和早期祖细胞常用多参数流式细胞术方法,选出CD34+CD33-DR-、CD34+CD38-Lin-或CD34+Thy1-等细胞群。这些样品中,富集了干细胞和早期祖细胞。如果表面标志选择正确,多参数比少参数精选的纯度更高。这种多参数法可用于干细胞及早期祖细胞的纯化和鉴定,在国外已经很普及。我国流式细胞术分选和多参数技术在干/祖细胞鉴定和精选中的重要性,正受到人们更多的注视。

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