在苛养菌鉴定过程中应该注意哪些关键性问题？

答：首先要密切与临床的联系，了解患者情况（如有无牲畜接触史或饮用生牛奶，提示布鲁菌感染的可能），加强标本直接涂片镜检的力度。初步鉴定时，氧化酶试剂应使用四甲基对苯二胺（较二甲基对苯二胺敏感），弱阳性者可延长判读时间至30～60秒。做触酶试验应挑取巧克力平板上的菌落进行，因为血平板中的羊血存在着内源性的触酶，使得结果难以解释（尤其弱阳性者）。做生化试验时，要求接种菌量要大些（有的菌种需要接种几块平板才够用），孵育时间要足够。靛基质试验最好接种酪氨酸肉汤，用Ehrlich试剂而不要用Kovac试剂（敏感性不同）。尿素酶试验用Christensen尿素琼脂斜面，接种菌量要多，在CO₂环境中孵育48小时。糖发酵试验要孵育5～7天后无反应才判为阴性。