答：酶联免疫斑点试验（enzyme-linked immunospot assay，ELISPOT assay）源自ELISA，又突破传统ELISA法，是定量ELISA技术的延伸和新的发展。两者都是检测由细胞产生的细胞因子或其他可
1答：生物素-链霉亲和素（biotin-streptavidin，BSA）酶免疫测定分析是在常规ELISA原理的基础上，结合生物素与链霉亲和素间的高度放大作用建立的一种检测系统。1分子SA可与4分子B相结
2答：ELISA反应的实质是抗原-抗体特异性结合。抗原抗体完成结合反应的保温过程称为孵育；每次孵育是为了使特异性的抗原抗体彻底结合，以避免在洗脱时把还没来得及与特异性抗原结合
3答：由于反应条件会影响ELISA方法的灵敏度和准确性，因而建立一个最佳反应体系是测定的一个重要环节。其中，常用的缓冲液有磷酸盐缓冲液、巴比妥缓冲液、醋酸缓冲液、硼酸缓冲液
4答：ELISA作为临床常用的免疫检测方法之一，可批量化操作，通常情况下不需特殊大型自动化仪器；因此检测成本较低。正因为其手工操作程序多，与全自动的发光测定系统，测定重复性稍逊，较
5答：固相载体在抗原或抗体包被后，吸附的蛋白仅占固相载体表面的一小部分，而留有许多空余位置，这些空余位置是造成酶标记物非特异性黏附，导致检测背景增高的主要原因。因此，在包被后
6答：洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤，但一定程度上影响检测结果的准确性。通过充分洗涤才能达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。洗涤的方法除某些ELISA仪器配有特殊的
7答：可溶性抗原或抗体吸附于固相载体而成为不溶形式，这是进行酶标记测定的基本条件。许多物质可作为固相载体，如纤维素、交联右旋糖酐、琼脂糖珠、聚丙烯、聚苯乙烯、聚乙烯及聚
8答：ELISA检测需要设置阳性对照孔和阴性对照孔以保证实验的准确性，如：用夹心法和间接法ELISA测定时，阳性对照孔应该显色，阴性对照孔应该无色；竞争和竞争抑制法ELISA中阳性对照孔应
9答：辣根过氧化物酶（HRP）常用的底物有邻苯二胺（o-phenylenediamine，OPD）、四甲基联苯胺（tetramethylbenzidine，TMB）和苯酚偶联底物等。其中，TMB氧化后其产物联苯醌在波长450nm处有最大
10答：辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）来源于植物辣根中，分子质量为40ku，是由无色酶蛋白（主酶）和亚铁血红素（辅基）组成的一种复合物。辅基是酶的活性基团，为深棕色的含铁卟啉
11答：酶免疫技术是利用酶催化底物反应的生物放大作用，选择合适的酶对抗体或抗原进行标记，是酶免疫测定中的重要环节。一个酶蛋白分子每分钟可催化103 ～104 个底物分子转变成有色产
12答：固相载体的选择是酶免疫分析技术中的重要环节。理想的固相载体应具备以下特点： 在检测过程中固相载体作为吸附剂和反应的容器不参与反应； 与抗体（抗原）以非共价或物理吸附方式
13答：包被是指将抗原或抗体固定到固相载体表面的过程；该过程可通过被动吸附、间接非共价吸附或共价吸附的方式进行。被动吸附：蛋白通过疏水性相互作用吸附于聚苯乙烯表面，是ELISA
14答：上述国产荚膜多糖ELISA试剂盒分析灵敏度< 0.5ng/ml；特异性达99%；检测范围为0.32～32ng/ml；与美国IMMY公司新型隐球菌抗原检测试剂盒（乳胶凝集法）进行对比试验（166例样本），阳性符合率
15答：上述国产半乳甘露聚糖ELISA试剂盒分析灵敏度0.1ng/ml；特异性达89%；测范围为0.1～10ng/ml；与Bio-Rad公司Platelia™ Aspergillus EIA检测试剂盒进行对比试验（109例样本），阳性
16ELISA法、IBT试验和MAR试验均可用于抗体的分型（IgG、IgM和IgA），不同的是，ELISA法的最大优点是可以同时检测大量标本，并可以检测抗体滴度；MAR试验和IBT试验必须每个样本单独检测，而
18基本原理将已知的抗原或抗体吸附在固相载体（聚苯乙烯微量反应板）表面，用酶标记的抗原或抗体与被固定的相应抗体或抗原发生特异性反应，反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离
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