在研究医院感染时，经常要判定某些病原体的变异规律和遗传关系，需要对微生物进行准确、适当的分型和分类，以确定这些微生物与疾病的发生、传播和流行之间的关系，最终制定防治措施。传统的分型方法如形态学、血清分型、生化分型等，只能分析到微生物的种、型或亚型水平，很难肯定相互之间是否具有同源性，难以判定具体的传染来源与传播类型。分子流行病学方法具有特异性和灵敏性高、稳定性好、所需标本量少等显著优点，使微生物分类、分型更为明确、简便，已成为医院感染研究中必不可少的重要工具。
答：医院感染中可能使用的分子流行病学研究方法包括：①全细胞可溶性蛋白图谱分析，主要包括SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）及蛋白质免疫印迹技术（Western blot）；②以染色体DNA为基
1答：常用五个指标来评价分型系统：①分型能力，对每种分离物提供肯定结果的能力；②重复性，当菌株重复实验时产生相同结果的能力；③分辨力，区分无关分离物的能力；④容易解释和应用；⑤费用
2答：以PCR为基础的基因分型方法有：随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphic DNA，RAPD）、随机引物PCR（arbitrary primer，AP-PCR）、扩增片段长度多态性（amplified fragment leng
3答：原核生物基因组中用于分型的重复性序列主要有两种：①基因外重复回文元件（repetitive extragenic palindromic elements，REP元件）；②细菌内基因重复一致序列（enterobacterial rep
4答：裂解酶Ⅰ是一种热稳定酶。核酸在95℃变性后，当温度降至50～60℃时，被分开的单链DNA与互补链结合之前自身形成特定的发夹圈，产生许多由非配对单链区域连接的茎环结构。裂解酶Ⅰ
5答：脉冲场凝胶电泳（pulsed field gel electrophoresis）是由普通的琼脂糖凝胶电泳演化而来的，用低频率切割酶原位消化细菌基因组，产生数量有限（约5～20个）、长度10～800kb的大片段DNA，在
6一、选取适当的参考菌株，所为适当，表示此参考菌株经由特定限制性内切酶切割后，应具备已知片段大小，且范围大小要涵盖测试菌株欲测定片段的最大与最小片段。由于胶体两侧及中间部
8答：MLST是一种新的DNA分子指印技术，具有高分辨力的分型方法。细菌内部有7个管家基因，这些基因片段长度不同，并且在不同菌株中，每一片段由于不同的等位基因而有不同的序列。用7对
9答：MLST适合长期大范围的流行病学调查研究。所得的实验结果因可提供更细致的序列讯息以解开菌株的演化过程，更易于解释菌株与流行病学间相关性，亦容易在不同实验室间作分析比对
10答：多基因座限制性分型法（multilocus restriction typing，MLRT）在MLST基础上，加以改进的新分型法，是一种简单、快速、重复性好的多基因座分型法。此法首先针对管家基因的七个基因
11答：MLST通过自动化核酸序列分析仪分析实验所标序列“多重管家基因”（multiple housekeeping genes）变得非常耗时，再加上昂贵的自动化核酸序列分析设备与荧光标记的降
12答：质粒同源性分析包括质粒图谱和质粒酶切图谱。这种方法是根据质粒的数量和相对分子质量来绘制图谱。同一种菌株可能含有不同类型和大小的质粒，提取后在电场中呈现不同的迁移
13答：蛋白质是基因的表达产物，对细菌蛋白质的检测分析可以了解核苷酸的某些特征。应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）及蛋白质免疫印迹技术（Western印迹）可在分子水平上对菌株进
14答：单链构象多态性分析（single strand conformation polymorphism，SSCP）是由Orita等于1989年首先建立的分析核酸（DNA和RNA）有无变异的方法。其基本原理是单链核酸在非变性聚丙烯酰
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