第三节 免疫荧光技术染色操作准备

免疫荧光技术染色操作和免疫组织化学技术在很多方面相同，但也有所不同。如果FITC标记抗体染色有非特异性荧光背景染色，可用伊文思蓝试剂作复染，背景呈红色荧光。伊文思蓝复染适用于结果为亮黄绿色荧光的FITC标记抗体的染色，而不适合结果为橙红色荧光的TRITC标记抗体的染色。用FITC标记抗体时，常用0.5mol/L碳酸盐缓冲液（pH 9.0）来溶解荧光素和稀释抗体，FITC在pH 8.5～9.5的碱性环境下发出荧光效果最好，所以一般用碳酸盐缓冲液（pH 9.0）。经免疫荧光染色后应及时观察，否则荧光会慢慢减弱 ......