作用液Ⅰ按以下试剂和剂量进行配制:0 ﹒ 2mol/L Tris‐顺丁烯二酸缓冲液20ml,腺苷‐5 ′‐磷酸钠(5 ′‐AMP)20mg,0.1mol/L硫酸镁5ml,蔗糖3~4g,蒸馏水22ml,2%硝酸铅3ml,最终pH 7 ﹒ 2。作用液中的腺苷‐5 ′‐磷酸钠和萘酚AS‐B1磷酸钠为作用底物,硫酸镁为酶的激活剂,硝酸铅为反应产物的捕捉剂。在染色中同时行抑制实验的对照,即在作用液Ⅰ中加入左旋咪唑(L‐tetramisole)5mmol/L,用以抑制碱性磷酸酶,在作用液Ⅱ中加入NiCl250mmol ......