[辅助检查]4﹒检测

1）配制：用封闭液稀释第一抗体，稀释度根据预试验来定。2）将纤维膜放入塑料袋中，按0.1mL／cm2加入第一抗体溶液，去除气泡，封膜机封口，4℃轻轻振摇2小时（室温或延长时间均可使蛋白检出率增加，但亦增加非特异结合），弃去反应液，用PBS洗3次，每次10min。反应时用碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶标记或同位素标记第二抗体，反应之后用底物显色或放射自显影来检测蛋白区带的信号，底物亦可与化学发光剂结合以提高敏感度［ 2 ］。H ﹒化学发光法有标记化学发光物质的化学发光免疫分析，标记荧光物质的荧光化学发光免疫分析 ......