二、影响核酸分子杂交的因素

核酸分子杂交实际上就是两条互补的单链核酸分子通过复性重新缔合形成双链的过程。这一过程受到诸多因素的影响。核酸浓度越大，单链核酸分子间碰撞几率高，复性速度越快。过高的温度不利于核酸复性，而温度过低，少数碱基配对形成的局部双链不易解离，适宜的复性温度是比Tm值低25℃。高浓度的盐使碱基错配的杂交体更稳定，故进行序列不完全同源的核酸分子杂交时，必须维持杂交反应液中较高的盐浓度和洗膜溶液的盐浓度。为减少非特异性杂交反应，须在杂交前封闭非特异性杂交位点，以减少其对探针的非特异性吸附作用。另一类是一些高分子化合物，如 ......