（三）小鼠胚胎成纤维细胞或STO滋养板的制备

ES细胞一般是在有滋养层的条件下进行培养，但有些ES细胞系则不需要滋养层，只需要在培养板上包被0.1%明胶即可（包被明胶是将0.1%明胶液包被在培养皿上2小时，然后吸掉明胶液，室温晾干）。抑制滋养层细胞增殖活性常用的方法有两种：丝裂霉素C（mytomycin C）处理和γ-射线照射。丝裂霉素C贮存液配制（0.5～1.0g/L PBS配制），4℃避光贮存1周，无Mg2 +、Ca2 +的Hanks液，胰酶/ EDTA（0.05%胰酶/ 0.02%EDTA），明胶Ⅱ型，DMEM含10%新生牛血清和10mg/L丝 ......