用体外胶原酶两步灌注法分离肝细胞,经密度梯度离心去除肝细胞碎片及坏死的肝细胞,重新混匀在不含胎牛血清(fatal calf serum,FCS)的冻存液中,计数,然后加入等量的冰冻混合物(40%培养液、40%FCS、20%D MSO等),再混匀,最终使肝细胞悬液密度为(3~。图7 9肝细胞冻存流程图。 ......