四、猪肝细胞的分离与培养

1 ﹒组织来源1～2月龄杂种猪（5～10kg），雌雄不限。取猪肝细胞悬液1ml（全肝细胞的细胞浓度为3 × 105个），接种于已经铺好鼠尾胶原的24孔培养板中，并加2ml含有100 μ g／L胰岛素、100 μ g／L胰高血糖素、100 μ g／L转铁蛋白、200 μ g／L氢化可的松、200 μ g／L头孢他啶的DMEM无血清培养基中，置37℃。1 ﹒分离所得的肝细胞在悬液中能存活4～6小时，可用于短时间的试验，可根据细胞良好的折光形态及锥虫蓝（0.2%）染色排斥试验确认细胞的活力。肝细胞可分泌白蛋白， ......