（一）骨内成骨细胞的培养

新生大鼠和兔的骨组织或死亡胎儿和手术切除的骨组织。0.1%Ⅱ型胶原蛋白酶和0.25%胰蛋白酶（1 ∶ 1，V/V）混合消化液，用PBS配成。用PBS洗2次后,将骨组织块放入用明胶处理过的培养皿或培养瓶中，每隔3天换液1次。待细胞长满培养皿或培养瓶底壁时,用0.25%胰蛋白酶消化细胞，传代培养。分离的成骨细胞在培养24小时后贴壁生长，呈梭形或多边形，约6天长满培养皿或培养瓶的底壁。2 .成骨细胞的鉴定：碱性磷酸酶染色时，成骨细胞的胞质及其周围基质呈阳性，但成纤维细胞染色呈阴性。也可用盖玻片培养，利用免疫细胞 ......