[概述]四、破骨细胞骨吸收抑制药物药效评价指标

细胞悬液移入预置骨片的96孔细胞培养板（100微升/孔）置5%CO2、37℃培养箱培养30min，用MEM冲去未贴壁细胞，加入培养液继续培养30min，更换含不同浓度药物培养液，对照培养孔更换等量不含药培养液，每24h换液50%。计数TRAP染色阳性多核（≥ 2个）细胞，计算药物对TRAP阳性多核破骨细胞数的抑制率。药物在某一时相点对TRAP阳性多核破骨细胞数的抑制率为：（n对照组TRAP阳性多核破骨细胞-n药物组TRAP阳性多核破骨细胞）/ n对照组TRAP阳性多核破骨细胞× 100%。培养不同时间点（如24h、48h和72h）或单点（如72h），采用试剂盒检测培养液中TRAP或TRAP5b和CTX-Ⅰ含量，比较药物组和对照组破骨细胞数量和功能的改变。