[速览]（二）感受态细胞的制备

1 ﹒大肠杆菌感受态细胞的制备和转化细菌转化的方法多以Mendel和Higa（1970年）的发现为基础，其基本方法是用冰预冷的CaCl 2或多种2价阳离子等处理细菌，使之进入感受态得以转化。用CaCl 2制备新鲜或冷冻的大肠杆菌感受态细胞，常用于成批制备感受态细菌。用冷却的无菌吸头从每种感受态细胞悬液中各取200μl转移到无菌的微量离心管中,每管加DNA或连接反应混合物（体积≤ 10 μ l，DNA ≤ 50ng），轻轻旋转以混匀内容物，在冰中放置30min。2 ﹒感受态细胞的冻存如一次制备的感受态细胞不能用完，可进行冻存保留。方法如下：将感受态细胞分装成400 μ l一份，每份加30%体积的甘油保存液。