[文献资料]一、与基因克隆有关的工具酶

DNA限制性内切酶是一类能识别双链DNA分子中特异核苷酸序列的DNA水解酶。为了减少操作或实验周期，人们往往使用两种内切酶同时水解处理目标物，这时，需要特别注意的是，选择适于这两种内切酶的反应缓冲液体系，或选择适用于针对内切酶的所谓通用缓冲体系，否则，应须对目的物DNA分别进行酶切处理。当用单一DNA限制性内切酶分别水解基因载体、目的基因两个末端，并利用DNA连接酶使线性基因载体与目的基因重组时，酶切生成的线性基因载体5 ′末端带有磷酸基，在DNA连接酶的作用下，线性基因载体发生自身环化的几率较高。