二、CYP450含量测定

细胞色素P450在还原状态下可与一氧化碳结合形成复合物，该复合物在波长450nm处具有特异性的吸收峰。而450～490nm波长的消光系数为91／（nmol／L · c m），可根据此系数计算CYP450的含量。测定时使用双光束紫外分光光度计进行测定，比色槽包含一个样品池和一个空白对照池，两道光束同时通过进行测定。细胞色素P450含量测定的计算公式为：式中，A ＝从波长490nm到450nm的OD值之差。有时在缓冲液中加20%的甘油减少转化为无活性的CYP420,一般测定不需要加甘油。进行扫描测定时如果420nm处吸收峰较明显,说明P450有部分失活，该样品不能使用。未诱导的微粒体样品P450含量为0.4～1.0nmol/mg.诱导过的样品，需要事先稀释样品。