（一）蛋白质分离技术——双向凝胶电泳（2‐DE）

双向凝胶电泳是目前蛋白质组学研究最有效的分离方法，是蛋白质组学的核心。双向凝胶电泳经过不断改进，已有四十多年的历史，其间不断提高灵敏度和分辨率，而且解决了重复性和上样量的问题，发展到今天已成为一种大规模的定性、定量分析手段。对特殊器官或组织的细胞在溶解前预先进行显微切割或色谱分离，随后再进行电泳分析，可以提高双向凝胶电泳的敏感性和双向凝胶电泳蛋白图谱的特异性。大多数双向凝胶电泳系统使用Tris‐甘氨酸缓冲液系统。利用不同浓度丙烯酰胺的分子筛作用可显著影响蛋白质的迁移，因此通过改变丙烯酰胺的浓度和梯度可优化包括高、中、低不同分子量的复杂组分混合物的分离。