酶联免疫分析技术(以下简称ELISA)的基础是抗体与其相应的抗原结合的能力。首先使特异性的抗体(即原始抗体,也称一抗)结合到microplate表面以激活固相,标准品或样品再与固相抗体作用,后者能捕捉靶抗原。再将这一复合物与已与辣根过氧化物酶(HRP)偶合的检测抗体(即第二抗体)作用,从而形成“抗体‐抗原‐抗体夹层”。第二抗体具有与所测分子不同的抗原决定簇结合的能力。如捕获抗体有从羊制备的多克隆抗NGF,NT‐3,NT‐4/5抗体,从兔制备的抗BDNF抗体。抗体的终浓度需参照相应的参考文献,或探索性实验。4 ﹒该方法同样适用于所有其它的神经营养物质的定量分析。
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