六、免疫细胞内cAMP浓度的测定

CA MP的测定是应用竞争性抑制反应的原理。CA MP可以与cA MP依赖的蛋白激酶特异性结合形成带有放射性的复合物。测定cA MP‐cA MP依赖的蛋白激酶复合物放射性强度，与标准相比，就可得到待测样品中cA MP的含量。目前主要有3H‐cA MP和125I‐cA MP两种标记测定法。标准曲线的测定:把标准cA MP稀释成不同浓度，加入一定量的3H‐cA MP，cA MP依赖的蛋白激酶和蛋白激酶抑制蛋白，总反应体积为50～200 μ l，反应在pH4.0的醋酸钠缓冲液中进行。2）待测样品cA MP浓度的确定：在标准曲线上找到cp m值与待测样品相同的点，其对应的cA MP浓度值即为待测样品的cA MP浓度。