[文献资料]（三）基于RNA层面的PCR扩增技术

基于PCR扩增的实时定量RT-PCR法具有快速简便、能同时明确ALK已知融合基因类型等优点。其原理是在融合位点两侧设计特异性引物和探针，通过多重引物RT-PCR法，检测ALK基因融合。目前，已获CFDA批准的RT-PCR法检测ALK融合基因的商品化试剂盒，能够检测7种EML4 - ALK融合基因突变。灵敏度较高，仅需100 ~ 500ng肿瘤组织的RNA即可完成检测。并且多种样本类型均适用，包括各类新鲜组织样本以及细胞学样本等。RACE-PCR联合测序法，该方法采用cDNA末端快速扩增技术结合两轮PCR技术来富集扩增ALK基因的融合变异体，敏感性较高，能够明确具体的变异类型。图27-6 ALK阳性晚期非小细胞肺癌诊断流程示意图。