[速览]（二）分子克隆的另一些酶

在DNA重组过程中，不仅DNA分子的制备需要酶来进行，而且DNA分子的切割、修饰、扩增，核酸分子的标记以及它们的核苷酸序列测定都需要酶的帮助。Klenow酶是大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的羧基端片段，为全酶的70%。在分子克隆过程中，有时为了最大限度避免载体DNA的自我连接（self‐ligation）和环化，常常要用细菌碱性磷酸酶（BAP）或牛小肠碱性磷酸酶（CIP）去除限制酶所产生的线状DNA两端的5 ′‐磷酸基。还有一个非常重要的用途就是，在经限制性内切酶酶切DNA片段后，用碱性磷酸酶处理，可以去除DNA或RNA的5 ′‐磷酸，阻止酶切的片段自身连接，这在克隆DNA片段时特别有用。表5‐9 DNA重组技术中最常用的工具酶。