1日龄SD大鼠,拉颈处死,75%乙醇浸泡5min,无菌分离四肢长骨,剔除软组织,用无血清Medium199培养液清洗2次,然后置于Medium199全培养液中,用解剖刀纵向切开骨干,将骨质内表面刮入培养液,再以圆头吸管吹打骨碎片5min,静置30s。吸取上层细胞悬液均匀接种于预置有象牙骨片的24孔培养板,细胞接种密度为1 × 105 / ml,每孔加培养液至2ml,37℃、5%CO2培养箱中培养8h。200倍下每组随机拍摄照片各6张,采用计算机图像分析系统计算陷窝与背景的面积比,以及骨吸收陷窝的平均光密度值计算骨吸收深度。
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