二、SAGE步骤过程

要获得完整而又有代表性的转录组，需要明确的鉴定和精确的量化转录情况，并运用无误而高效的分子处理手段。以下简要叙述文库构建的过程。为此，一些学者进行了若干技术改进，以期能提高文库构建中某些步骤的效率和整个过程的稳定性。这种“一管化”方案使得操作者可以对微量样本进行“微SAGE ”文库构建，这种微量样本的细胞数一般在1 × 105数量级，m RNA在1～5ng水平。Datson等使用的m RNA量刚够满足文库构建，因此无法作对照比较，也就无法证实改进方案相比于原方法的有效性。尽管如此，现有的结果已提示“一管化”方案并不会产生误差，并且对于微量样本的文库构建更为有效。