[文献资料]三、Griess 反应法

NO测定的Griess反应原理见图7‐1。培养第二天换液，以去除悬浮之死亡细胞，第4～5天，用阿糖胞苷（终浓度10 μ mol／L）处理24小时，以抑制非神经细胞的生长，然后每3～4天换一次新鲜的完全培养基（1ml），细胞培养至12～14天观察照像并开始以下实验。NOS提取液→加新鲜配制的NADPH和L‐Arg（终浓度为2mmol／L）各10 μ l激发反应3h（反应总体积为150 μ l）→加乳酸脱氢酶2 μ mol和丙酮酸盐5 μ.Mol以终止反应→ Griess反应测定亚硝酸盐含量。对照组不加NADPH和L‐Arg，实验值减去对照值即为NOS活性。