七、细胞蛋白激酶A（PKA）活性测定

用核素γ‐32P‐ATP催化活性测定法，即以核素γ‐32P‐ATP为磷的供体，以特异的多肽为底物，分析PKA作用后把32P连接到底物上，底量即代表PKA催化活性。PKA是一类cA MP依赖性蛋白激酶，所以必须加入cA MP。荧光素酶检测方法，荧光素酶通常被用于研究培养细胞的生物学特性，由于哺乳动物细胞中无内源荧光素酶，在荧光素酶基础上进行激酶分析会更快速、可靠和方便。激酶活性检测试剂盒是一种通过激酶和底物反应，激酶底物可以是多肽、蛋白或脂肪。荧光素酶反应中需要ATP的参加，激酶磷酸化反应中也需要消耗ATP，当激酶反应结束，加入等体积的测量发光信号，光信号和体系中的ATP成正比，和体系中激酶活性成反比。