[文献资料]二、cAM P 蛋白质竞争结合法

本方法是利用cAMP与特异性蛋白激酶（简称结合蛋白）结合时，标记及非标记cAMP的竞争抑制的原理。当反应系统中结合蛋白和标记cAMP的量一定时，非标记的cAMP量多，则结合蛋白与标记cAMP结合量少，反之，非标记cAMP量少，则结合蛋白与标记cAMP结合量多。设法把结合的cAMP‐蛋白复合物与游离的cAMP分开，测量结合的标记cAMP放射强度，即能测算出溶液中所含非标记的cAMP含量。固体结合蛋白溶于冰冷TE缓冲液中，浓度视结合蛋白的结合力而定，以能结合［ 3H ］ cAMP 50%左右为宜。5 ﹒ ［ 3H ］ cAMP，结合蛋白和吸附剂用量比例要适当。