用作叶酸拮抗剂(如甲氨蝶呤、乙胺嘧啶或甲氧苄啶等)的解毒剂。用于防治甲氨蝶呤过量或大剂量治疗后所引起的严重毒性作用。也可用于叶酸缺乏所引起的巨幼细胞性贫血的治疗。与氟尿嘧啶合用,用于治疗晚期结肠、直肠癌。临床使用本品应用现配液,避免光线直接照射及热接触。