（二）肿瘤坏死因子（tumournecrosisfactor，TNF）的检测

L929细胞株检测法：小鼠成纤维细胞株L929在TNF的作用下，可以出现死亡，用MTT可使活细胞染成蓝紫色，测定活细胞摄入染料的OD值，间接反映TNF的生物活性。4 ﹒倍比稀释样品及标准品TNF，各取100 μ l加入96孔培养板，并加入放线菌D（终浓度2.5μ g／ml），对照孔只加放线菌D。6 ﹒离心弃上清液，每孔加0.04mol／L的盐酸异丙醇120 μ l或二甲亚砜，用微量振荡器振荡至沉淀完全溶解，在酶标仪570nm处读取OD值。标准品及待测样品的稀释倍数的倒数比再乘以标准品的活性单位，即为TNF的活性单位。3 ﹒加入放线菌D可提高细胞对TNF的敏感性（10～100倍）。