以颈椎脱臼法或在二氧化碳室内将25只(体重200g左右)成熟大鼠处死。在一离心管内加入4ml 77.2%(W/V)蔗糖溶液,然后缓慢分次加入4ml样品液(样品中蔗糖、尿素、Sarkosyl的终浓度分别为54%、1mol/L、0.09%),4ml 40%(W/V)蔗糖,1ml 34%蔗糖(以上蔗糖溶液均溶于含1mol/L尿素的BB)。4 ﹒不溶物超声处理,加入80ml含76%(W/V)蔗糖的Tris‐KI缓冲液使蔗糖最终浓度达到50%。除含Sarkosyl的溶液外,其他溶液均含有1mmol/L的EDTA、TAME、碘乙酸。在一些溶液中还含有1mmol/L PMSF。
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