[文献资料]八、酶联抗体显色

免疫偶联的辣根过氧化物酶最常用的底物是3，3 ’‐二氨基联苯胺，它与过氧化物酶结合后产生棕色条带。4）50ml，3，3 ’‐二氨基联苯胺25mg，1mol／L NaCl 350 μ l，避光条件下搅拌10min后过滤，临用前加入17 μ l 30%H2O2。经免疫反应结合的碱性磷酸酶可催化底物5‐溴‐4氯‐3‐吲哚磷酸氮蓝四唑（BCIP／NBT）在相应部位产生深蓝色条带。取132 μ l NBT溶液加20ml碱性磷酸酶缓冲液混匀，加入66 μ l BCIP溶液（此混合液应在30min内使用）。除了上述二种显色法外，还有放射免疫法，其检测灵敏度很高（可测出5～100 μ g蛋白质），但由于受同位素条件的限制和污染，使用较少。