免疫组化的抗原通常是一种肽或蛋白,有数量不等的抗原决定簇。抗原决定簇由暴露于表面的在空间上相邻的3~8个氨基酸组成。一个抗原上可以有多个抗原决定簇,由此而产生的抗血清中可能含有针对不同决定簇的抗体,这一类抗体称为多克隆(polyclonal)抗体。因为抗体仅识别特定的抗原决定簇,而不识别抗原本身,因此不同物质只要有相同的抗原决定簇,均可被同一抗体识别,在免疫组化中就产生了抗体的特异性及交叉反应问题(图13‐。间接法则不需直接标记特异抗体(第一抗体),而是标记第二或第三抗体。