以差速离心法制备大鼠肝匀浆细胞各亚细胞组分为例。0)悬液溶酶体沉淀,将其铺在梯度上面,用玻璃棒搅动最上层的梯度,使梯度与溶酶体之间界面破坏,然后100000 × g离心150min,此后在梯度溶液中可见有3条明显带和较少的沉淀,最下面的黄褐色带为纯化的溶酶体,中间浅黄色带为纯化的线粒体。每次10min,沉淀线粒体可贮于少量缓冲液A中,欲进一步纯化:①可将线粒体沉淀溶于6ml10mmol/L K H2PO4(pH7 ﹒。而在51.3%层和底部回收两个组分,分别为内膜和基质膜(从沉淀中分离出来),分别悬浮于缓冲液A中,以12000 × g离心10min,参考表9‐3各测其标志酶活性。
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