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(二)各种细胞器的分离

以差速离心法制备大鼠肝匀浆细胞各亚细胞组分为例。0)悬液溶酶体沉淀,将其铺在梯度上面,用玻璃棒搅动最上层的梯度,使梯度与溶酶体之间界面破坏,然后100000 × g离心150min,此后在梯度溶液中可见有3条明显带和较少的沉淀,最下面的黄褐色带为纯化的溶酶体,中间浅黄色带为纯化的线粒体。每次10min,沉淀线粒体可贮于少量缓冲液A中,欲进一步纯化:①可将线粒体沉淀溶于6ml10mmol/L K H2PO4(pH7 ﹒。而在51.3%层和底部回收两个组分,分别为内膜和基质膜(从沉淀中分离出来),分别悬浮于缓冲液A中,以12000 × g离心10min,参考表9‐3各测其标志酶活性。

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——《药理实验方法学》
书名:《药理实验方法学》
栏目:药理实验方法学 > 第四篇 细胞与分子药理学技术 > 第九章 细胞和亚结构的分离技术与细胞凋亡的测定方法 > 第一节 细胞和亚细胞结构的分离技术 > 二、亚细胞结构分离技术
作者:魏伟 吴希美 李元建
参编:王广基,吴希美,吴春福,张永祥,李元建
页码:257-258
版本:4
出版时间:2010-05-01
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