三、构建疼痛基因腺病毒载体感染体外培养的大鼠神经干细胞

重组腺相关病毒2型载体具有嗜神经细胞的特性，并能整合于宿主细胞，使外源基因在宿主细胞内长期表达［ 1 ］。构建疼痛基因‐人前脑啡肽原基因的腺相关病毒载体使其感染体外培养的大鼠神经干细胞，建立镇痛神经干细胞库并观察外源基因的表达及相关蛋白的分泌。药品及试剂：神经干细胞培养基，表皮生长因子，碱性成纤维生长因子，胎牛血清，巢蛋白抗体和微管相关蛋白2抗体，胶质原纤维酸性蛋白抗体，重组人前脑啡肽原基因腺相关病毒载体，对照载体重组腺相关病毒2／增强型绿色荧光蛋白。取培养第3代的神经干细胞球，接种于6孔板内，每孔加入2ml神经干细胞培养基。传代后神经干细胞保持上述生长特性，经巢蛋白免疫组织化学鉴定为神经干细胞。