纸片扩散法药敏试验

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纸片扩散法药敏试验适合测试哪些细菌的药敏试验?

答:纸片扩散法药敏试验适合快生长细菌的药敏测试,不能对无判定折点的细菌作药敏测试。目前CLSI已颁布纸片折点的细菌有肠杆菌科细菌、弧菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄

纸片扩散法药敏试验适合测试哪些细菌的药敏试验?
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纸片扩散法药敏试验质量控制遇到问题时应如何处理?

纸片扩散法排除问题指南

纸片扩散法药敏试验质量控制遇到问题时应如何处理?
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纸片扩散法检测MRS菌株时需要注意什么?

答:应注意以下几点:①严格按照CLSI文件上的标准操作程序进行;②使用新鲜培养的纯菌落制备菌液;③以30μg头孢西丁纸片代替苯唑西林纸片进行检测;④在低于35℃的空气环境中孵育,

纸片扩散法检测MRS菌株时需要注意什么?
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为什么纸片扩散法不能用于厌氧菌药敏试验?

答:这是因为:标准的纸片扩散法是用于快速生长的需氧菌和兼性厌氧菌的,不适于厌氧菌,因此,该方法所设立的判断标准也不能用于厌氧菌药敏结果的判读。

为什么纸片扩散法不能用于厌氧菌药敏试验?
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酵母样真菌纸片扩散法药敏对培养温度和时间有什么要求?

答:酵母样真菌纸片扩散法要求35℃培养24~48小时后观察结果。

酵母样真菌纸片扩散法药敏对培养温度和时间有什么要求?
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目前有几种抗真菌药的纸片可进行纸片扩散法药敏试验?

答:氟康唑和伏立康唑(可用美国BD公司BBL产品),另外有ROSCO公司生产的多种抗真菌药物的纸片,包括有氟康唑、酮康唑、伊曲康唑、两性霉素B和氟胞嘧啶等。如采用ROSCO纸片应按说明书

目前有几种抗真菌药的纸片可进行纸片扩散法药敏试验?
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纸片法药敏试验的结果判断标准是如何制定的?

答:CLSI于2003年颁布M44-P对酵母样真菌纸片扩散药敏试验的判断标准,但只提供氟康唑(FCZ)和伏立康唑(VCZ)的标准,见表:CLSI M44-P对纸片扩散法的判断标准(mm)

纸片法药敏试验的结果判断标准是如何制定的?
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纸片法药敏试验中,更改药敏试验中任一材料或方法时,应如何做质量控制试验?

答:更改药敏试验中任一材料或方法时,应进行质控试验以确证这些更改不会对采用原有方法获得的结果产生影响。质控天数见表:纸片法药敏试验质量控制试验频率参考指南注1:使用本指

纸片法药敏试验中,更改药敏试验中任一材料或方法时,应如何做质量控制试验?
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何为Stockes纸片比较法药敏试验?

答:Stockes纸片比较法是用标准敏感菌株作为对照菌,与被试菌涂在同一琼脂平皿上,根据对照菌与受试菌在药物纸片周围产生的抑菌圈大小,判断受试菌株为敏感、中度敏感或耐药。本法

何为Stockes纸片比较法药敏试验?
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纸片法药敏试验中,孵育时应如何正确放置药敏试验平皿?

答:应该倒置。因为涂布有菌液的药敏平皿在培养过程中会形成冷凝水,药敏平皿倒置培养,可以避免在培养的过程中形成的冷凝水滴落到琼脂表面,而导致细菌被污染或琼脂中从纸片扩散出

纸片法药敏试验中,孵育时应如何正确放置药敏试验平皿?
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β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的药敏质量控制?

如何对β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂进行药敏质量控制?答:目前大多数临床微生物学实验室采用大肠埃希菌ATCC 25922、金黄色葡萄球菌ATCC 25923、铜绿假单胞

β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的药敏质量控制?
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β溶血链球菌药敏试验如何进行质量控制?

答:β溶血链球菌包括具有A群(化脓性链球菌)、B群(无乳链球菌)、C或G群抗原形成较大菌落(直径≥0.5mm)的化脓性链球菌,需要用肺炎链球菌ATCC 49619进行质量控制。需要使用M-H琼

β溶血链球菌药敏试验如何进行质量控制?
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标准菌株的保存方法有几种?各有什么特点?

答:标准菌株保存方法:为了保持标准菌株的最大活性,避免和减少细菌变异的机会可采用以下方法保存:冷冻干燥法:应用冷冻干燥机冻干菌种的方法是最理想的保存方法。但操作烦琐,菌种保

标准菌株的保存方法有几种?各有什么特点?
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标准菌株应具备哪些条件?其来源有何要求?

答:标准菌株必须是形态、染色反应、生理生化及血清学特性典型而稳定的菌株。实验结果重复性好,极少发生变异,可用《伯杰系统细菌学手册》提供的典型特征来对照。标准菌株可由专

标准菌株应具备哪些条件?其来源有何要求?
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为什么CLSI对标准菌株抑菌圈直径参照标准是一个质控范围?

答:质控菌株对抗菌药物纸片显示一定大小的抑菌圈,其抑菌圈直径的大小用某数值范围来表示,即质控结果可能出现的最小和最大抑菌环直径。此界限范围有95%的置信区间。抑菌圈直径

为什么CLSI对标准菌株抑菌圈直径参照标准是一个质控范围?
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为什么肺炎链球菌和脑膜炎奈瑟菌不能采用增菌法制备菌悬液?

答:因为这两种细菌在生长过程中会产生自溶酶而导致自身菌被杀死,因此,建议采用直接菌落制备菌悬液。

为什么肺炎链球菌和脑膜炎奈瑟菌不能采用增菌法制备菌悬液?
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纸片扩散法试验中细菌的稀释液是什么?

答:稀释液应为0.85%的生理盐水。渗透压过低或过高都会对细菌细胞造成破坏。

纸片扩散法试验中细菌的稀释液是什么?
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药敏试验时,不同细菌其菌悬液的制备方法有何差异?

答:不同细菌其菌悬液的制备方法是不一样的。可采用直接菌落法或生长法制备菌悬液的细菌有:肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌、嗜麦芽窄食单胞菌、肠

药敏试验时,不同细菌其菌悬液的制备方法有何差异?
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药敏试验中菌悬液的制备有哪几种方法?

答:药敏试验菌悬液制备主要有两种,一是直接菌落法,挑取纯分的单个菌落于无菌的生理盐水中,使菌液浓度为0.5麦氏浊度即可;二是生长法,采用增菌法制备菌液,将纯分的新鲜菌落接种于M-H

药敏试验中菌悬液的制备有哪几种方法?
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阅读纸片扩散法药敏试验结果时杀菌剂和抑菌剂有何不同?

答:杀菌剂必须阅读细菌完全被抑制的抑菌圈范围,如氨基糖苷类药物、β-内酰胺类药物等;而对于抑菌剂,只需阅读细菌80%被抑制的抑菌圈直径即可,如复方磺胺甲唑等。

阅读纸片扩散法药敏试验结果时杀菌剂和抑菌剂有何不同?
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纸片扩散法适合于哪些细菌的药敏试验?

答:纸片扩散法主要用于对营养要求不高且生长速度较快的非苛养菌。如肠杆菌科细菌、非发酵菌、葡萄球菌、肠球菌和链球菌等。生长速度较慢的细菌如结核分子杆菌不宜采用纸片扩

纸片扩散法适合于哪些细菌的药敏试验?
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体外报告耐药的药物体内治疗一定无效吗?

答:是的。一般情况体外报告耐药的药物体内治疗一定无效,但在特殊情况时可能出现有效的想象。90/60原则的疗效的解释也是基于此。

体外报告耐药的药物体内治疗一定无效吗?
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体外报告敏感的药物体内治疗一定有效吗?

答:不一定。体外药敏试验条件较单一而恒定,而体内环境比较复杂。再者,抗菌药进入人体后还有一个吸收、分布的过程,必须能在感染部位达到有效浓度才能起到杀死病原菌的作用。

体外报告敏感的药物体内治疗一定有效吗?
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纸片法药敏试验无任何抑菌圈出现,是报告抑菌圈直径为零吗?

答:如果没有任何抑菌圈出现,应报告该药物的抑菌圈直径为6mm,因为抗菌药纸片的直径即为6mm。

纸片法药敏试验无任何抑菌圈出现,是报告抑菌圈直径为零吗?
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纸片扩散(K-B)法药敏试验的注意事项有哪些?

答:K-B法药敏试验的注意事项主要有:①K-B法所用琼脂为标准的M-H琼脂,该琼脂具有以下几个特点:琼脂成分以及pH水平得到了严格的控制;M-H琼脂上同一抗菌药对同一株细菌的抑菌圈直径

纸片扩散(K-B)法药敏试验的注意事项有哪些?
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葡萄球菌属和肠球菌属细菌对不同抗菌药的培养时间是否一致?

答:有所差异。葡萄球菌属和肠球菌属的常规培养条件均为:35℃± 2℃,空气培养,16~18小时。但在葡萄球菌属药敏试验中,检测苯唑西林、甲氧西林、奈夫西林和万古霉素时,培养时间

葡萄球菌属和肠球菌属细菌对不同抗菌药的培养时间是否一致?
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对于不同种类的细菌,纸片扩散法药敏试验的培养条件是否一致?

答:有所差别。①大部分需氧菌的培养条件为:35℃± 2℃,空气培养,16~18小时。如肠杆菌科细菌、假单胞菌属细菌、葡萄球菌属、肠球菌属、霍乱弧菌等。②不动杆菌属、洋葱伯克

对于不同种类的细菌,纸片扩散法药敏试验的培养条件是否一致?
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影响抗菌药扩散及活性的因素有哪些?

答:①抗菌药的分子量大小:分子量越小,抗菌药越容易在琼脂中扩散,敏感菌株形成的抑菌圈也就越大,如青霉素、磷霉素、利福平等。分子量越大,抗菌药则不易在琼脂中扩散,敏感菌株形成的

影响抗菌药扩散及活性的因素有哪些?
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纸片法药敏试验的标准接种菌量是多少?

答:菌液标准浓度为0.5麦氏单位,相当于1.5 × 108CFU/ml。接种菌液浓度过高,抑菌圈会变小,而产酶菌株则更能破坏药物的抗菌活性;反之,菌液浓度过低,抑菌圈就会增大。

纸片法药敏试验的标准接种菌量是多少?
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做药敏试验时,不同国家地区对培养基是否有不同要求?

答:不同的国家由于参照的标准有所差别,故培养基的要求也有所不同。如美国CLSI标准文件要求纸片法药敏试验所用的培养基必须是M-H培养基;而英国参照的是BSAC标准文件,其要求的培

做药敏试验时,不同国家地区对培养基是否有不同要求?
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培养基的质量控制包括哪些方面?

答:操作卡:各微生物学实验室应建立标准的培养基操作卡,内容包括培养基的成分,配制及注意事项。培养基的质量要求:①配制记录:应注明培养基原料的开封日期、储存条件、有效期、有否

培养基的质量控制包括哪些方面?
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培养基对药敏试验结果的影响因素有哪些?

答:①pH:pH的变化可对药敏试验的抑菌圈直径大小造成影响。如pH偏低将导致大环内酯类和喹诺酮类药物的抑菌圈变小或导致四环素类药物的抑菌圈直径变大。②培养基中含有能拮抗抗

培养基对药敏试验结果的影响因素有哪些?
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保证纸片法药敏试验结果正确性的关键是什么?

答:主要有以下几点:①优质的药敏培养基;②标准的细菌接种菌量;③正确含量的抗菌药纸片及保存环境;④合适的培养环境;⑤有效的质量控制;⑥训练有素的技术人员。以上条件缺一不可。

保证纸片法药敏试验结果正确性的关键是什么?
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如何正确地阅读K-B法药敏试验结果?

答:将药敏平皿倒置,在反射光下测量。若链球菌属、嗜血杆菌属因血平皿或特殊营养物质补充平皿的影响,可将平皿盖移去,在反射光下测量。而对于某些特殊的细菌和抗菌药则需要采用透

如何正确地阅读K-B法药敏试验结果?
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如何进行规范化的K-B法操作?

答:即上述4个步骤的规范化操作。①药敏培养平皿,M-H琼脂培养基(对胸腺嘧啶的核苷含量是否超标要用粪肠球菌ATCC 29212质控),培养基厚度约4mm等。②待测菌的菌液制备和接种:从过夜

如何进行规范化的K-B法操作?
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纸片扩散法主要包括哪几个操作步骤?

答:该方法包含4个主要的操作步骤:①药敏平皿的制备;②待测菌的菌液制备;③菌液接种;④含抗菌药纸片的放置。完成上述前3个步骤后,放入35℃温室或温箱培养16~18小时后阅读结果。

纸片扩散法主要包括哪几个操作步骤?
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什么是纸片扩散法?其原理是什么?

答:纸片扩散法试验就是Kirby-Bauer(K-B)试验。是临床微生物学实验室最常规的药敏感性试验的方法。其原理是:将浸有抗菌药的纸片贴在涂有细菌的琼脂平皿上,抗菌药在琼脂内向四周扩

什么是纸片扩散法?其原理是什么?
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