真菌药敏试验的方法

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标准菌株和参考菌株有什么异同?

答:标准菌株和参考菌株都是实验室用于质量控制的参照物,也常用于设备、试剂校正的参考物。但标准菌株和参考菌株是有不同的,标准菌株是指某些菌株具有某种标准菌株的典型的生物

标准菌株和参考菌株有什么异同?
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现有参考范围的丝状真菌药敏参考菌株有哪些?

有黄曲霉ATCC 204304;烟曲霉ATCC 204305。

现有参考范围的丝状真菌药敏参考菌株有哪些?
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现已有参考范围的真菌药敏标准菌株有哪些?

答:有近平滑念珠菌ATCC 22019;克柔念珠菌ATCC 6258。

现已有参考范围的真菌药敏标准菌株有哪些?
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什么时间要进行真菌药敏的质量控制?

答:由于真菌药敏的结果判断需要考虑多种因素,不同的药物有不同的终点定义,所以真菌药敏的质量控制应随每一批药敏试验同时进行是最理想的;在更换试剂的批号或在自动化系统软件升

什么时间要进行真菌药敏的质量控制?
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光滑念珠菌对氟康唑和伊曲康唑有敏感性低现象,怎么报告结果?

光滑念珠菌对氟康唑和伊曲康唑存在固有的敏感性低的现象,应如何报告结果?答:针对光滑念珠菌的检测,建议将其对氟康唑和(或)伊曲康唑敏感的结果改为中介,因为该菌对这两个药存在固有

光滑念珠菌对氟康唑和伊曲康唑有敏感性低现象,怎么报告结果?
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真菌药敏终点拖尾现象应如何处理?

答:在检测白念珠菌、都柏林念珠菌和热带念珠菌时,氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑可出现拖尾现象,导致MIC偏高,尤其在使用仪器判断结果的时候。针对这三个药建议用肉眼判读其MIC值,特

真菌药敏终点拖尾现象应如何处理?
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ATB Fungus-3结果定义中的中介与CLSI定义的SDD有什么不同?

答:对于氟康唑(FCA)、伊曲康唑(ITR)和伏立康唑(VRC),用ATB Fungus-3所获得的“I”分类相当于CLSI定义的SDD(susceptible dose-dependent,剂量依赖型敏感)。

ATB Fungus-3结果定义中的中介与CLSI定义的SDD有什么不同?
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ATB Fungus-3如何观察结果会更正确?

答:Fungus-3试剂条中氟胞嘧啶只有2个稀释浓度,一个高浓度,另一个低浓度,报告以敏感度报告;对AMB、FCA、ITR、VRC可报告MIC值。要正确阅读ATB Fungus-3药敏结果应遵守以下规则:一、

ATB Fungus-3如何观察结果会更正确?
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ATB Fungus-3测试药敏方法对培养温度、环境和时间有什么要求?

答:需把试剂条放入一个密封容器或是一个装有吸潮纸的GENbox型广口容器里,在有氧条件下35℃(+ 2℃)的环境中,念珠菌属要培养24小时(+ 2小时),新型隐球菌要培养48小时(+ 6小时)后观察结

ATB Fungus-3测试药敏方法对培养温度、环境和时间有什么要求?
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酵母样真菌纸片扩散法药敏对培养温度和时间有什么要求?

答:酵母样真菌纸片扩散法要求35℃培养24~48小时后观察结果。

酵母样真菌纸片扩散法药敏对培养温度和时间有什么要求?
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目前有几种抗真菌药的纸片可进行纸片扩散法药敏试验?

答:氟康唑和伏立康唑(可用美国BD公司BBL产品),另外有ROSCO公司生产的多种抗真菌药物的纸片,包括有氟康唑、酮康唑、伊曲康唑、两性霉素B和氟胞嘧啶等。如采用ROSCO纸片应按说明书

目前有几种抗真菌药的纸片可进行纸片扩散法药敏试验?
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深部丝状真菌用微量稀释测试药敏试验时的孵育温度和时间要求?

答:培养温度要求在35℃,但培养时间按不同真菌类别是不相同的,如根霉菌需培养21~26小时可判读结果;而镰刀菌、曲霉菌和申克孢子丝菌需培养46~50小时才判读结果;波氏假性阿利什霉需孵

深部丝状真菌用微量稀释测试药敏试验时的孵育温度和时间要求?
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如何设置MIC测试范围?

答:稀释系列应包含CLSI提供的判断折点的敏感、中介和耐药的浓度范围;无判断折点的药物可根据该药物药代动力学数据获得的体内疗效评判标准如Cmax/MIC制订稀释范围;按药敏试验报

如何设置MIC测试范围?
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临床常用抗真菌药物测试浓度范围是什么?

答:常用的抗真菌药包括氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、酮康唑和新三唑类抗真菌药如伏立康唑。测试的MIC范围见表:常用抗真菌药MIC测试稀释范围

临床常用抗真菌药物测试浓度范围是什么?
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试验药物不能溶解于水怎么办?

答:不溶于水或难溶于水的药物可用二甲亚砜(DMSO)、乙醇、聚乙二醇、羧甲基纤维素等非水溶剂进行溶解,但具体应选择哪一种应根据厂家提供的资料作决定。对用非水溶剂溶解的药物应

试验药物不能溶解于水怎么办?
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如何配制试验药物的储存液?

答:配制储存液首先要确立配制的浓度。选择试验需要配制的浓度系列,浓度系列中最高的含量为基准;配制高于最高含量10倍的超浓溶液,即可成为试验药物的储存液。对难溶于水和不溶于

如何配制试验药物的储存液?
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应如何计算药物的真正含量?

答:①按厂家提供的分析含量称重,如厂家说明书提示该药物的分析含量为99.5%,即1mg = 0.995mg;②按计算公式计算你需要的浓度下的溶液应称该药物的质量:质量(mg)=体积(ml需要配制溶液

应如何计算药物的真正含量?
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为什么测试的抗真菌药物必须用厂家的原药?

答:抗真菌药物含量是否计算正确是真菌药物敏感试验能否正确报告的重要因素,所以必须正确配制试验药物的溶液:因为临床制剂常常为了溶解和使用的需要加入其他药物成分如复性剂等

为什么测试的抗真菌药物必须用厂家的原药?
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琼脂扩散法和E-test真菌药敏试验要求接种物的浓度是多少?

答:琼脂扩散法和E-test真菌药敏试验要求接种物配制0.5麦氏单位菌悬液,相当于1 × 108CFU/ml。

琼脂扩散法和E-test真菌药敏试验要求接种物的浓度是多少?
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琼脂稀释法真菌药敏试验要求接种物的浓度是多少?

答:琼脂稀释法真菌药敏试验,要求配制0.5麦氏单位浓度的菌悬液(相当于1 × 108CFU/ml),再作两倍稀释获得1 × 104CFU/ml菌悬液,每一药物稀释孔加入5μl菌悬液。

琼脂稀释法真菌药敏试验要求接种物的浓度是多少?
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丝状真菌的接种浓度如何计算?

:可通过菌落计算,具体操作如下:将配制好的菌悬液稀释100倍,然后吸取0.01ml,接种于沙保弱葡萄糖琼脂培养基,均匀涂开,35℃培养后作菌落计数。

丝状真菌的接种浓度如何计算?
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丝状真菌药敏试验如何调节菌悬液浓度?

答:微量稀释法药敏试验采用分光光度计测试菌悬液浓度,不同真菌类别要求浓度不同,曲霉菌、申克孢子丝菌OD值应调节至0.09~0.11(80%~82%透光度),镰刀菌、波氏假性阿利什霉OD值应调至0.

丝状真菌药敏试验如何调节菌悬液浓度?
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丝状真菌如何制备菌悬液?

答:采集产孢期原始分离培养基上分离的菌落悬浮于含吐温20的生理盐水中,静置3~5分钟,使大颗粒沉于试管的底部,取上层均匀液体(内含试验所需的孢子囊孢子、分生孢子和菌丝体)至另一无

丝状真菌如何制备菌悬液?
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丝状真菌的接种物应如何作前培养?

答:大多数菌株必须在35℃用PDA(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)上活化7天;镰刀菌必须在35℃孵育48~72小时后再在25~28℃孵育到第7天;在孵育7天的菌落上滴加含0.01ml吐温20的生理盐水1ml,制

丝状真菌的接种物应如何作前培养?
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用于酵母样真菌药敏试验的分离物培养多少天为最佳?

答:用于酵母样真菌药敏试验的菌株可采用培养1~3天的培养物均可以,不同菌种生长速度不完全相同,根据菌株生长实际状况可作选择。

用于酵母样真菌药敏试验的分离物培养多少天为最佳?
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葡萄糖亚甲蓝琼脂扩散法测定真菌药敏试验的原理是什么?

答:待测真菌均匀涂在葡萄糖亚甲蓝M-H琼脂上,贴浸泡了待测药物的纸片,经24~48小时培养,测定抑菌圈直径,按CLSI颁布的M-44-A的标准判断敏感性。

葡萄糖亚甲蓝琼脂扩散法测定真菌药敏试验的原理是什么?
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ATB Fungus-3依据什么原理测试真菌药敏?

答:ATB Fungus-3试剂条包括16凹(cupules)形反应杯。第一对不含任何抗真菌剂,用作阳性生长对照。氟胞嘧啶包含一个高浓度一个低浓度2个稀释孔,另外的13对包含不同稀释度的4种抗真

ATB Fungus-3依据什么原理测试真菌药敏?
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哪些方法可用于丝状真菌的药敏测试?

答:宏量肉汤稀释法、微量稀释法和E-test方法可用于丝状真菌药敏的测试。

哪些方法可用于丝状真菌的药敏测试?
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目前有哪些能用于真菌药敏试验的方法?

答:宏量肉汤稀释法;微量肉汤稀释法;琼脂稀释法;E-test方法;葡萄糖亚甲蓝琼脂扩散法;自动化系统ATB Fungus-3方法;氧化还原比色法;流式细胞仪测定法。但常用于临床的有:ATB Fungus-3方

目前有哪些能用于真菌药敏试验的方法?
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