第二节 标签融合蛋白结合实验

标签融合蛋白结合实验是一个基于亲和层析原理的、分析蛋白质体外直接相互作用的方法。该方法利用一种带有特定蛋白序列标签（tag）的纯化融合蛋白作为钓饵，在体外与待检测的纯化蛋白质温育，然后用可结合蛋白标签的琼脂糖珠将融合蛋白沉淀回收，洗脱液经电泳分离并染色。如果两种蛋白质有直接的结合，待检测蛋白质将与融合蛋白同时被琼脂糖珠沉淀（pull-down），在电泳胶中可见到相应条带（图13-7）。这样的系统通过几个蛋白质标签串联排列，增加了对相互作用蛋白质的纯化能力，加上质谱技术的应用，成为在细胞内进行蛋白质复合物筛 ......