（一）癌细胞原代培养

癌细胞建系的方法和程序相似于正常细胞，包括标本收集和取材、消化和培养、传代、换液、冻存、复苏等过程。针对癌细胞特点有以下改进内容。在癌细胞建系中，选择性培养基的应用是提高癌细胞体外存活、抑制成纤维细胞生长的关键技术改进。针对癌细胞的特点，选择性培养基应含少量血清。在培养器皿底部接种能形成接触性抑制的成纤维细胞饲养层，可以有利于癌细胞贴壁生长和抑制癌组织中正常成纤维细胞过度生长。24小时后换液，胰蛋白酶消化细胞，再接种到新培养瓶，每毫升5 × 104细胞加入培养基，培养24～48小时作为饲养层。 ......