[辅助检查]二、样品制备与杂交反应

样品的标记主要采用荧光标记法，也可用生物素、放射性核素等标记。常用荧光色素Cy3、Cy5或生物素标记dNTP，后者可通过链亲和素偶联的荧光素、丽丝胺、藻红蛋白等进行进一步检测。核酸二级结构的影响:样品制备过程中,对核酸的片段化处理，不仅可提高杂交信号的强度，还可提高杂交速度。由于正常互补配对双链要比具有错配碱基的双链分子具有较高的热力学稳定性，如果探针与样品分子出现错配或不配对，则该位点荧光强度就会减弱，而且荧光信号的强度还与样品中靶分子的含量呈一定的线性关系。 ......