酶联免疫斑点法(ELIspot)试验可用于检测生成特异性抗体的B细胞和生成特异性细胞因子的T细胞。检测生成特异性抗体的B细胞时,首先将特异性抗原包被固相微孔反应板,然后加入待测的抗体生成细胞,若该细胞分泌针对固相抗原的抗体,即可与固相抗原结合,再用酶标二抗和显色剂对相应抗体进行检测。在低倍镜下计数每孔中显色的酶点数,即抗体生成细胞数。本法可以用于测定组织中的单个抗体分泌细胞。对于双色反应,按顺序加入HRPO底物和碱性磷酸酶底物(均为可溶性的),首先加碱性磷酸酶底物,放置5~30分钟使其显色(蓝色斑点),用 ......