[文献资料]四、基因转移细胞的鉴定

为鉴定血管壁细胞基因转移的效率，可选用二个报告基因，一是人胎碱性磷酸酶，二是lac Z基因。人胎碱性磷酸酶在65℃以上，仍具有抗热稳定性，而内源性碱性磷酸酶在65℃时即被灭活。根据这个原理，细胞或组织在加热到65℃以后，如果仍然具有人胎碱性磷酸酶活性，即表示该细胞已被带有人胎碱性磷酸酶基因的DNA转移成功。细胞转移至人胎碱性磷酸酶基因后2天,可做人胎碱性磷酸酶染色。加上碱性磷酸酶测定底物, 19小时后观察，如出现深蓝紫染色，即表示存在人胎碱性磷酸酶，基因转移成功。加入X‐gal底物溶液, 37℃，6～18 ......