三、实时定量PCR的实验流程

在进行实时荧光定量PCR实验前，需要设计一个较完善的实验方案，包括：设立严谨的实验组和各种对照组，选择处理样品、提取模板的方法，设计PCR引物，选择荧光标记方法，确定定量计算机统计分析的方式等等。PCR反应需要在实时定量PCR仪专用反应板或管中进行，加入所有反应试剂后，将反应板置入仪器内，按照仪器操作说明完成反应和数据记录。所以，2 ? Δ Δ CT表示的是实验组目的基因的表达相对于对照组的变化倍数，使用这一方法可以直接得到的目的基因相对于管家基因的定量，而不必制作标准曲线，也可以排除在创造标准曲线时因为 ......