[辅助检查]（五）H5 反向点杂交

H5反向点杂交（reverse dot blot，RDB）与经典的点杂交不同的是，膜上固定寡核苷酸探针（ASO），即为“反向”的含义。目前RDB杂交信号的检测一般采用非同位素方法［ 5，6 ］。探针的膜固定: 1）在合成的ASO探针的3 ’端加上一段多聚（dT）尾，带尾的ASO在点膜后经紫外光照射，其dT尾与尼龙膜上的氨基作用结合在膜上。2）PCR引物5 ’端修饰法：在DNA合成仪上直接合成5 ’断连接有活性氨基的寡核苷酸引物，继之经化学修饰将标记物（生物素或地高辛等）连接于此活性氨基上。 ......