（二）膜内成骨细胞的培养

新生大鼠和兔的骨或死亡胎儿和手术切除的骨。0.1%EDTA和0.25%胰蛋白酶（1 ∶ 1，V/V）混合消化液以及0.1%Ⅰ型胶原蛋白酶，用PBS配成。1 .断头处死动物，取扁骨或长骨，剥除骨膜，用PBS反复清洗骨膜。2 .将骨膜剪成1～2mm2组织块，放入混合消化液中，在37℃条件下消化20～30分钟。4 .加入0.1%Ⅰ型胶原蛋白酶，在37℃条件下将组织块消化90分钟。6 .用培养液混悬沉淀细胞，调整细胞密度至1 × 106～5 × 106个/ ml，放培养箱中培养。7 .待细胞长满培养皿或培养瓶的底 ......