未成年兔或猪的膝关节软骨,也可取自死亡胎儿的骺软骨。0.2%Ⅱ型胶原蛋白酶,用HBSS配成。1 .用手术刀将关节软骨削下,放入PBS中,反复冲洗。3 .将软骨组织块放入烧瓶中,加入消化液,在37℃水浴箱中轻微振荡消化5小时以上,直至组织块基本消失和消化液变混浊为止。5 .用培养液混悬沉淀细胞,细胞密度为0.5 × 106~2 × 106个/ ml。6 .当细胞长满培养皿或培养瓶的底壁时,用0.125%胰蛋白酶溶液消化,传代培养。1 .前3代细胞仍保持软骨细胞的生物学特征,细胞呈圆形或椭圆形,产生较丰富的细 ......