软骨细胞体外培养的主要方法是酶消化法。耳静脉空气注射法处死后,无菌条件下分离后肢关节软骨和肋软骨,剥离包裹软骨组织的筋膜和软骨膜,放入盛有PBS液的培养皿中。1 )消化液,以覆满瓶底为限,置温箱2 ~ 3分钟后,显微镜下观察到细胞质已回缩,细胞间隙增大,即向培养皿里滴入2ml左右含血清的培养液终止消化,收集第1代培养细胞,用弯头吸管吸取混合液,反复多次轻吹皿底细胞,使细胞彻底从培养瓶底壁脱落,收集细胞混合液。软骨细胞可以特异性地合成氨基多糖、 Ⅱ型和Ⅹ型胶原,并具有碱性磷酸酶( ALP或AKP )活性,免 ......