根据标记反应的过程和形成结合物的结构特点,可按直接偶联和间接偶联两种方法制备标记结合物。碳二亚胺法、过碘酸盐氧化法和重氮盐偶联法等均属于直接偶联。芳香胺能与NaNO2及HCl反应生成重氮盐,该重氮盐能直接与蛋白质的酪氨酸残基上的酚羟基邻位反应,形成偶氮化合物。根据洗脱液346nm吸光度值可计算出每摩尔IgG上的鲁米诺摩尔数,即比活性,计算公式为:标记物比活性=鲁米诺(mol)/IgG(mol)。 ......