在肝细胞复苏时,融化速度要快,尽量缩短复苏时间,使之迅速通过最易受损期。此时细胞内外不会重新形成较大的冰晶,也不会使细胞在溶液中暴露时间过长,从而减轻冰晶损伤和溶质损伤,使冻存的肝细胞经复苏后仍保持正常的结构和功能。如果用0℃U W液短期保存肝细胞,复苏方法较为简单:即弃去U W液,用含1%BSA的Krebs Henseleit缓冲液(简称KHB)冲洗二次,再用percoll密度梯度离心法去除无活力的肝细胞和细胞碎片,剩余肝细胞团重新放入K HB溶液或其他培养液,作其他研究用。 ......