三、酵母双杂交系统中常见问题与解决方案

酵母双杂交实验虽然对蛋白质相互作用研究具有重要的推动作用，但是具体实施时也存在许多问题，需要在实验设计和实施中予以注意。酵母双杂交实验带来的最大的困惑是假阳性，即在待测蛋白间没有发生相互作用的情况下，报告基因被激活，一般称为自激活。引起假阳性的主要原因是BD融合诱饵蛋白甚至AD融合靶蛋白本身单独存在时即可激活报告基因的转录。各公司几经换代的各种酵母双杂交系统采用了多个报告基因，且每个报告基因的上游调控区又各不相同，这可减少大量的假阳性。在酵母双杂交的应用中有时也会遇到假阴性现象，即两个蛋白本应发生相互作用 ......