分子排阻色谱法是在装有多孔性材料的色谱柱中进行分离的,分离原理为凝胶色谱柱的分子筛机制。当流动相携带不同分子量的溶质进入色谱柱后,溶质会因为浓度差而渗入填料的孔径中。多孔性材料的孔径大小不同,不同分子体积的溶质在孔径中的扩散路径也不同,图11 - 14为不同大小的样品分子在色谱柱中扩散的示意图。0)为体积排阻色谱的排阻极限,即分子量大于10 6的分子,不论其分子量有多大,理论上它们都会被排斥在填料孔洞之外,以单一谱带A ′流出柱外,保留体积一律为V 0。通常将图中A、B两点间的分子量范围叫作色谱柱的分级范围,由此可知,只有填料的孔洞体积V p才是具有分离能力的有效体积。
……