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四、DNA 损伤检测(单细胞凝胶电泳法,SCGE)

亦称彗星法(Comet assay),是检测DNA损伤的简单、敏捷、有效方法。其基本原理是裂解的DNA片段在电场的作用下移出细胞,未损伤的DNA移动较慢仍停留在核内,因此用DNA彗星的尾巴长短和形状来估计DNA损伤的程度。将经过处理或未处理细胞悬液(105/ml)与1%低熔点的琼脂糖按1 ∶ 10体积混合(42℃),取75 μ l铺在预先涂有一层正常熔点琼脂糖的载玻片上(使用前置37℃预热),然后于4℃固定10分钟,浸入预冷的裂解液(2.5mol/L NaCl,100mmol/L EDTA。TBE主要用来检测DNA双链损伤,而碱性电泳液对DNA损伤非常敏感,可检出DNA单链的小量损伤,但需严格控制温度变化。

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——《神经药理学研究技术与方法》
书名:《神经药理学研究技术与方法》
栏目:神经药理学研究技术与方法 > 第1章 神经细胞培养与检测 > 第7节 培养神经细胞的测定指标与方法
作者:张均田 张庆柱
参编:HideyoshiHigashi,李锦,库宝善,杜冠华,张庆柱
页码:0
版本:1
出版时间:2005-02-01
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